3'-концевое биотин-мечение специфических зондов (TUNEL)
Набор рассчитан на 20 реакций
- Применение
- Характеристики
- Состав
- Загрузки
- Дополнительно
Набор предназначен для получения меченых биотином ДНК или олигонуклеотидов.
Процесс мечения осуществляется путем включения меченого биотином мононуклеотида (биотин-11-dUTP,) к концевой 3'-ОН группе ДНК. В результате на 3'-конце ДНК образуется гомополимерный "хвост" из добавляемого нуклеотида.
Полученный меченый зонд можно использовать для гибридизации в Southern или Northern блотах, а также (это является основным преимуществом данного набора!) для выявления и выделения уникальных последовательностей нуклеиновых кислот (РНК или ДНК).
Пометив при помощи данного набора уникальный зонд, вы можете отслеживать экспрессию уникального гена, выделяя и измеряя количество экспрессируемой мРНК.
Мечение концевой 3'-ОН широко используется в методе TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling).
Мечение ник-концов при помощи терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы dUTP представляет собой метод обнаружения фрагментации ДНК путем мечения 3'-гидроксильных концов в двухцепочечных разрывах ДНК, образующихся во время апоптоза.
TUNEL - это метод обнаружения апоптотической фрагментации ДНК, широко используемый для идентификации и количественной оценки апоптотических клеток или для обнаружения чрезмерного разрыва ДНК в отдельных клетках. Анализ основан на использовании терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT), фермента, который катализирует прикрепление дезоксинуклеотидов, меченных биотином, флуоресцеином или другим маркером, к 3'-гидроксильным концам двухцепочечных разрывов ДНК. Этим методом также можно маркировать клетки, ДНК которых имеет повреждение вызванные другими причинами кроме апоптоза.
- Хранение-20°C
- Транспортировкаохлаждение: + 4°C
Терминальная дезоксинуклеотидил трансфераза
x5 Реакционный буфер
Биотин-11-dUTP, 1 мМ водн. раствор
dATP, 10 мМ водн. раствор
Деионизированная вода
0.5 М ЭДТА, рН 8.0