3'-концевое флуоресцеин-мечение специфических зондов (TUNEL)

Набор предназначен для получения меченых флуоресцеином ДНК или олигонуклеотидов.

Процесс мечения осуществляется путем включения меченого флуоресцеином мононуклеотида (флуоресцеин-12-dUTP,) к концевой 3'-ОН группе ДНК. В результате на 3'-конце ДНК образуется гомополимерный "хвост" из добавляемого нуклеотида.

Полученный меченый зонд можно использовать для гибридизации в Southern или Northern блотах, а также (это является основным преимуществом данного набора!) для выявления и выделения уникальных последовательностей нуклеиновых кислот (РНК или ДНК). 

Пометив при помощи данного набора уникальный зонд, вы можете отслеживать экспрессию уникального гена, выделяя и измеряя количество экспрессируемой мРНК.

Мечение концевой 3'-ОН широко используется в методе TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling).

Мечение ник-концов при помощи терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы dUTP представляет собой метод обнаружения фрагментации ДНК путем мечения 3'-гидроксильных концов в двухцепочечных разрывах ДНК, образующихся во время апоптоза.

TUNEL - это метод обнаружения апоптотической фрагментации ДНК, широко используемый для идентификации и количественной оценки апоптотических клеток или для обнаружения чрезмерного разрыва ДНК в отдельных клетках.  Анализ основан на использовании терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT), фермента, который катализирует прикрепление дезоксинуклеотидов, меченных биотином, флуоресцеином или другим маркером, к 3'-гидроксильным концам двухцепочечных разрывов ДНК. Этим методом также можно маркировать клетки, ДНК которых имеет повреждение вызванные другими причинами кроме апоптоза.