SileksMag-NH₂, магнитные частицы с NH₂ группой

Магнитные частицы с аминогруппой поставляются в виде водной суспензии в готовом для использования виде.
Магнитные частицы с аминогруппой дают возможность осуществить ковалентную иммобилизацию антител или белка по Вашему выбору. Исходные частицы имеют SiO₂ оболочку, обладают высокой гидрофильностью и низкой неспецифической сорбцией белков на своей поверхности. Для возможности иммобилизации белков частицы модифицированы и имеют на поверхности активные NH₂ группы.
Магнитные частицы с аминогруппой рассчитаны на проведение процедуры ковалентного связывания белка на своей поверхности. В результате этой процедуры Вы получаете возможность для:
- иммуномагнитного выделения уникальных клеток или белков из биологических жидкостей,
- повышения чувствительности иммунологических исследований за счет концентрирования специфического материала

Преимущества ковалентного связывания по сравнению с пассивной адсорбцией
 Ковалентное связывание позволяет связать на поверхности на 20-40% белка больше, чем при пассивной адсорбции
 Ковалентное связывание легко стандартизовать и унифицировать, получая частицы с определенным уровнем покрытия
 Ковалентно пришитые белки значительно стабильнее. Так, после 1 часа при 56 °С количество IgG на ковалентно пришитых частицах остается практически неизменным около 100% , в то время, как на частицах с пассивной адсорбцией только 50-70%
 В случае маленьких белков только ковалентная пришивка может удержать их на поверхности
 Когда белок привязан ковалентно, можно создавать достаточно жесткие условия для уменьшения неспецифического взаимодействия связанного белка с другими белками.

Количество иммобилизуемого белка
Предлагаемые частицы могут связать 60 мкг бычьего сывороточного альбумина (БСА, 65 кДа) или 50 мкг IgG (150 кДа) на 1 мг частиц. При связывании белков, отличных от указанных, следует учитывать размер белка: более мелкие белки могут быть связаны в большем количестве, более крупные в меньшем. По мере того, как иммобилизуемый белок связывается на поверхности, скорость и эффективность связывания уменьшаются. Решить эту проблему можно либо увеличением времени иммобилизации, либо создавая избыток белка больше того количества, которое может быть иммобилизовано частицами. Конечно, в случае дорогостоящих иммобилизуемых материалов последний вариант нежелателен.

Влияние температуры и времени на процесс иммобилизации
Температура имеет слабое влияние на процесс ковалентной иммобилизации. В том случае, если иммобилизуемый белок термолабилен, можно проводить реакцию иммобилизации при +10 °С. Увеличение продолжительности самого процесса иммобилизации с 2 часов до 5 часов увеличивает количество иммобилизованного белка приблизительно на 10-15%.