SileksMagIMCombo-NH2 (магнитные частицы для прямой иммобилизации или посредством NH2 группы)
для оптимальной иммобилизации антител, белков, ферментов и выделения бактериальных клеток
- Применение
- Характеристики
- Иммобилизация
- Загрузки
- Дополнительно
Магнитные частицы с полимерным покрытием для альтарнативной иммобилизации поставляются в виде водной суспензии в готовом для использования виде. Использование частиц возможно также в системах автоматического выделения.
Магнитные частицы с полимерным покрытием для альтарнативной иммобилизации дают возможность осуществить более оптимальную иммобилизацию антител или белка на поверхности в зависимости от свойств иммобилизуемой молекулы. Частицы с иммобилизованными агентами (антителами, специфическими белками и т.д.) можно также использовать и для выделения уникальных бактериальных клеток.
Частицы представляют собой парамагнитное ядро, инкапсулированное в покрытым гидрофильным инертным носителем оболочку. Частицы имееют на поверхности высокую плотность активных групп, позволяющих осуществлять как высокоэффективную и стабильную прямую иммобилизацию без предварительной подготовки поверхности, так и иммобилизацию путем функционализации амино групп с последующей ковалентной пришивкой.
Основное преимущество данных частиц в том, что они благодаря особенностям своей поверхности позволяют выбирать наиболее оптимальный способ иммобилизации. В особенности это касается иммобилизации специфических белков для изучения белок-белковых или белок-нуклеиновых взаимодействий, а также ферментов.
Мы рекомендуем использовать данные частицы для иммобилизации антител, белков и ферментов.
- ОсноваОксид железа (III)
- Тип магнетизацииСуперпарамагнетик (нет остаточного намагничивания)
- Форма частицСфера
- Размер300-400 нм
- Концентрация5 мг/мл
- Емкость частиц (зависит от буфера и иммобилизуемого объекта)около 40 мкг бычьего сывороточного альбумина (БСА, 65 кДа) на1 мг частиц
около 200 мкг БСА на 1 мл частиц - Буфер хранениястерильная вода
- Условия хранения+4°C, не замораживать
- ТранспортировкаСпециальных условий не требуется
Выбор способа иммобилизации определяется в первую очередь природой (свойствами) иммобилизуемого объекта.
Полимерная поверхность частиц имеет функциональные группы, которые обеспечивают прочное взаимодействие с иммобилизуемой молекулой без предварительной подготовки поверхности. По силе связывания иммобилизация на данной поверхности сопоставима с ковалентной пришивкой. Нужно помнить, что, нековалентная иммобилизация на поверхности будет отличаться от ковалентой пришивки в первую очередь из-за разной ориентации молекулы, обусловленной ее функциональными группами. В большинстве случаев нековалентная иммобилизация может быть более оптимальной, чем ковалентная пришивка.
Иммобилизация белка
Количество иммобилизуемого белка
Предлагаемые частицы поставляются в концентрации 5 мг/мл и могут связать около 40 мкг бычьего сывороточного альбумина (БСА, 65 кДа) или антител на 1 мг частиц или около 200 мкг БСА или антител на 1 мл частиц.
При связывании белков, отличных от указанных, следует учитывать размер белка: более мелкие белки могут быть связаны в большем количестве, более крупные в меньшем. По мере того, как иммобилизуемый белок связывается на поверхности, скорость и эффективность связывания уменьшаются. Решить эту проблему можно либо увеличением времени иммобилизации, либо создавая избыток белка больше того количества, которое может быть иммобилизовано частицами. Конечно, в случае дорогостоящих иммобилизуемых материалов последний вариант нежелателен.
Влияние температуры и времени на процесс иммобилизации
Температура имеет слабое влияние на процесс иммобилизации, но важна для состояния иммобилизуемого белка. Поэтому мы рекомендуем проводить реакцию иммобилизации при +10°С с использованием ротатора (равномерного вращательного перемешивания).
Для проведения иммобилизации мы рекомендуем следующие условия:
Буфер для иммобилизации: PBS (но может быть использован другой буфер, не содержащий компонентов с амино группами)
Конечная концентрация частиц: 0.5-1 мг/мл (низкая концентрация суспензии позволяет получать более равномерное покрытие поверхности частиц)
После проведения иммобилизации частицы нужно 3-5 раз промыть в буфере для иммобилизации и хранить в подходящем буфере при +4°C с добавлением Tween 20 до конечной концентрации 0.01-0.5% и азида натрия до конечной концентрации 0.1-0.2%.
SileksMagIMCombo-NH2 магнитные частицы с комбинированным покрытием для альтернативной иммобилизации.
Описание и протокол иммобилизации.
Выделение клеток с использованием магнитных частиц
СкачатьОсобенности применения магнитных сорбентов при выделении нуклеиновых кислот и белков. Обзор.
Скачать